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启动子通常位于基因编码区的5' 端上游,是DNA分子上可以与RNA聚合酶特异性结合并使之开始转录的部位。通过选择不同的启动子,可以控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度,是高效表达外源基因的关键。
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融合tag(如flag等)或marker基因(如GFP)的外源基因真核表达质粒转染目的细胞(如293T细胞)后,继续培养一定时间,之后收集细胞提取总蛋白,Western Blot方法检测外源基因的表达
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活体动物光学成像技术作为新兴的成像技术以其操作简单、结果直观、灵敏度高、成本低等特点,成为活体动物成像的一种理想方法。
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通过使用工具病毒载体介导将外源基因导入肺部细胞中,对疾病特定基因进行定向和组织特异性的改造,将为肺疾病研究与治疗提供强大工具。
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抗体活性检测预实验用于确定目的基因抗体的有效性——检测Western blot抗体是否有效,是否能够识别在目的细胞中目的基因的内源表达,确定总蛋白上样量,抗体稀释比例,显色曝光时间等参数。
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